结直肠肿瘤中TEIF基因的表达及其与中心体改变的关系.pdf

结直肠肿瘤中TEIF基因的表达及其与中心体改变的关系.pdf

格式: pdf 页数: 6 文件大小: 0MB
结直肠肿瘤中TEIF基因的表达及其与中心体改变的关系.pdf !癌症" !"#$%&% ’()*$+, (- .+$/%*# 0112# 03$40%&506675030 !基础研究! 58 北京大学医学部病理学系" 北京 499525 08 北京世纪坛医院病理科" 北京 5999:3 !" #$%&’()$*( +, -&(.+/+01" 2$&/(. 345$*4$ 6$*($’ +, -$75*0 8*59$’:5(1" ;$5<5*0" !==!>!" -" ?" 6.5*& @" #$%&’()$*( +, -&(.+/+01" ;$5<5*0 3.5<5(&* 2+:%5(&/" ;$5<5*0" !===AB" -" ?" 6.5*& 通讯作者!张 波 !(**%&;($<%$/% =(# >( ?"+$@ A%,8# 3B84983039004C D+E# 3B84983039004C FG+#,# H"+$@I(JIKG)8%<)8/$ 收稿日期!0112L1:L:5 修回日期!0112L1BL0C !!"#$%&’$" (&’)*%+,-. &-. /"01’$231# !"#$%"&’(" )&*+(,&-.)-$+*# "#"%"+)(/ -+)"&*,)-+0 1*,)$& $!234% 0"+" 1$5+6 &","+)#7 87 $5& &"("*&,9 0&$5. -( * )&*+(,&-.)-$+ 1*,)$& $1 * :-+6 $1 95%*+ )"#$%"&*(" &";"&(" )&*+(,&-.)*(" $9!<=!% 0"+"& *+6 ">.&"(("( -+ %*+7 :-+6( $1 )5%$& )-((5"(? !9-( ()567 @*( )$ ";*#5*)" )9" ">.&"((-$+ $1 !2A4 .&$)"-+ -+ 95%’+ ,$#$&",)’# )5%$&( ’+6 )$ ">.#$&" -)( ,$&&"#’)-$+ @-)9 ,"+)&$($%" ’8+$&%’#-)7? 41$5+.## B9" ">.&"((-$+ $1 B2A4 -+ CD (.",-%"+( $1 +$&%’# -+)"()-+’# %5,$(’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’ )9" 6-11"&"+,"( $1 B<AJ ()&$+0 .$(-)-;" &’)" 8")@""+ O&*6" ! *6"+$%* *+6 P&*6" " $& # *6"+$%* @"&" ()*)-()-,*##7 (-0+-1-,*+) $!HDNDF%& *+6 )9" 6-11"&"+," $1 B<A4 ()&$+0 .$(-)-;" &*)" 8")@""+ P&*6" " *6"+$%* *+6 P&*6" # *6"+$%* @*( +$) ()*)-()-,*##7 (-0+-1-,*+) $! KDNDF%N A%%5+$1#5$&"(,"+," &"(5#)( (9$@"6 )9*) ,"+)&$($%" *%.#-1-,*)-$+/.$(-)-;" &*)" @*( (-0+-1-,*+)#7 9-09"& -+ )9" ,$#$&",)*# ,*+,"& 0&$5. )9*+ -+ )9" +$&%*# 0&$5. $& )9" *6"+$%* 0&$5. $8$)9 !HDNDI%’ )9" 6-11"&"+," $1 )9" ,"+)&$($%" *%.#-1-,*)-$+ .$(-)-;" &*)" 8")@""+ P&*6" A *6"+$%* *+6 P&*6" # *6"+$%* @*( ()*)-()-,*##7 (-0+-1-,*+) $!HDNDF%& *+6 )9" 6-11"&"+,"( $1 )9" ,"+)&$($%" *%.#-1-,*)-$+ .$(-)-;" &*)" 8")@""+ P&*6" " *6"+$%* *+6 P&*6" ! $& # *6"+$%* @"&" ()*)-()-,*##7 (-0+-1-,*+) $!KDNDF%N 8+-’7,#2+-## B<A4 .&$)"-+ *+6 ,"+)&$($%" *%.#-1-,*)-$+ -( ,$%%$+#7 1$5+6 -+ ,$#$&",)*# )5%$&(N B9" ">.&"((-$+ #";"# $1 B<A4 -( &"#*)"6 )$ )5%$& 9-()$#$0-,*# 0&*6" *+6 %*#-0+*+) 6"0&""N B<A4 .&$)"-+ ">.&"((-$+ *+6 ,"+)&$($%" *%.#-1-,*)-$+ (9$@"6 * 9-09 6"0&"" $1 .$(-)-;" ,$&&"#*)-$+N 91: ;+%.## ,$#$&",)*# +"$.#*(%& )"#$%"&*(" )&*+(,&-.)-$+*# "#"%"+)(/ -+)"&*,)-+0 1*,)$&& 0"+" ">.&"((-$+& ,"+)&$($%" "摘 要 # 背 景 与 目 的 !AFMN 基 因 是 本 室 新 近 发 现 的 一 种 调 节 端 粒 酶 "AFOA 基 因 表 达 的 转 录 因 子&在 多 种 肿 瘤 组 织 中 均 有 表 达( 本 研 究 观 察 AFMD 基 因 在 结 直 肠 肿 瘤 组 织 中 的 表 达 及 其 与 中 心 体 改 变 的 关 系( 方 法!通 过 原 核 表 达 AFMD 蛋 白 免 疫 制 备 多 克 隆 抗 体 &经 免 疫 印 迹 鉴 定 后 &对 59 例 结 直 肠 黏 膜 正 常 组 织 ):9 结直肠肿瘤中 <=>? 基因的表达及其 与中心体改变的关系 高 颖 5"0" 张 波 5 =@A%1##2+- +B <=>? A%+$12- 2- ’+7+%1’$&7 $,C+%# &-. 2$# ’+%%17&$2+- ;2$5 ’1-$%+#+C1 &"-+%C&72$: Q-+0 P*$I&R *+6 S$ T9’+0I !"## C M Y K 结直肠肿瘤是最常见的消化道肿瘤之一!占消 化道肿瘤的第二位"近年来随着在分子水平上对结 直 肠 肿 瘤 发 病 机 制 研 究 的 不 断 深 入!人 们 逐 渐 认 识 到!结直肠肿瘤发生时包括腺瘤性结直肠息肉病 #!"#$基 因%$%& 基 因%’()*+ 基 因 等 多 基 因 共 同 从 分子水平上调控细胞的增殖%凋亡等过程!从而导 致肿瘤的形成&,!-’( 中 心 体 #./01)2+23/$ 也 叫 微 管 组 织 中 心 #34.)215657/ 2)8*049408 ./01/)! :;<#$) 几 乎 所 有 的人类非整倍体肿瘤中均有中心体异常 &&’" ;=>? *1/723/)*+/ 1)*0+.)4$1420*7 /7/3/01+( 401/)*.1408 @*.12)$基因是本研究室克隆的调节端粒 酶 A;=B; 基因表达的转录因子 &C’) 研究表明 ;=>? 在多种肿瘤组织高表达!并与肿瘤*肉瘤$的组织分 级或恶性度有关 &%’) 最近的研究表明!;=>? 基因定 位于中心体&D’!而中心体的异常可以直接导致肿瘤 的发生) 这些发现提示 ;=>? 与人肿瘤的发生密切 相关! 而端粒失能及 EFG 损伤后导致 ;=>? 向 中 心体移动!同时引起中心体扩增) 本研究通过制备 特异多克隆抗体来检测人结直肠肿瘤 *包括结直 肠癌及结直肠腺瘤$ 组织中 ;=>? 基因的表达!并 通过免疫荧光的方法对结直肠肿瘤中心体的表达 进行检测!从而探讨结直肠肿瘤中 ;=>? 基因的表 达与中心体改变的关系) ! 资料与方法 !"! 组织标本来源及一般病例资料 采 用 回 顾 性 研 究 方 法 ) 病 例 取 自 北 京 世 纪 坛 医 院 -HH%I-HHJ 年 手 术 切 除 及 活 检 病 例 存 档 蜡 块 ! 并 根 据 -HH- 年 KL< 结 直 肠 肿 瘤 分 类 进 行 病 理 学 诊 断 和 免 疫 组 织 化 学 鉴 定 ) 结 直 肠 癌 &H 例 !其 中 男 性 ,D 例 !女 性 ,C 例 +年 龄 C&MJ% 岁!中 位 年 龄 D& 岁) 病 理 类 型 主 要 有 ,结 直 肠 高 分 化 腺 癌 % 例 -结 直 肠 中 分 化 腺 癌 ,N 例 %结 直 肠 低 分 化 腺 癌 J 例 +结 直 肠 腺 瘤 , 级 ,J 例 *包 括 管 状 腺 瘤 ,J 例 $!其 中 男 性 ,& 例 !女 性 % 例 ! 年 龄 CNMJ& 岁 !中 位 年 龄 DNO% 岁 +结 直 肠 腺 瘤 - 级 ,N 例 *包 括 管 状 腺 瘤 & 例 +绒 毛 状 腺 瘤 , 例 + 绒 毛 状 管 状 腺 瘤 ,& 例 $!其 中 男 性 P 例 !女 性 J 例 !年 龄 %-MJ- 岁 !中 位 年 龄 DJ 岁 +结 直 肠 腺 瘤 & 级 ,P 例 *包 括 管 状 腺 瘤 - 例 + 绒 毛 状 腺 瘤 & 例 +绒 毛 状 管 状 腺 瘤 ,C 例 $!其 中 男 性 ,H 例 !女 性 P 例 !年 龄 -NMJC 岁 !中 位 年 龄 NH 岁 !其 中 包 括 腺 瘤 局 部 恶 变 病 例 D 例 ) 正 常 肠 黏 膜 组 织 ,H 例 !其 中 男 性 D 例 !女 性 C 例 !年 龄 CNMNN 岁 !中 位 年 龄 NC 岁 ) !"# 免疫血清制备 参 见 文 献&D’所 述!将 纯 化 的 ;=>? 融 合 蛋 白 免疫雄性新西兰 白 兔) 初 次 免 疫,, 38 融 合 蛋 白 与等体积完全弗氏佐剂充分乳化后于兔背部皮下 多点注射) 加强 免 疫,, 38 融 合 蛋 白 与 等 体 积 不 完 全 弗 氏 佐 剂 乳 化 !部 位 同 上+于 ,C Q 后 重 复 加 强免疫 , 次!剂量%部位同上)初次免疫后第 %D 天 经颈动脉取血!分离血清!分装并冻存于I-HR)免 疫前取耳静脉血清!作为对照) !"$ %&’(&)* 印迹分析 硝酸纤维素膜上!经脱脂奶粉封闭后!用制备 兔血清*,. - HHH$ &NR , A 结合),S磷酸缓冲液洗涤 后!生物素化羊抗兔 >8T*,. %HH$室温 , A!加链卵白 素I碱性磷酸酶*,. %HH$室温 , A 结合!FU;(UV>" 显 色) 免疫前兔血清作阴性对照) !"+ 免疫组织化学 组织切片依次经二甲苯脱蜡- 梯度乙醇水化 后 !于 HO&W过 氧 化 氢 室 温 , A 处 理 !柠 檬 酸 缓 冲 液 于 微 波 P%R -H 340 抗 原 修 复 ) 牛 血 清 白 蛋 白 *-W $ 室 温 封 闭 , A 后 ! 滴 加 抗 ;=>? 血 清 例 结 直 肠 癌 和 %C 例 结 直 肠 腺 瘤 *!级 ,J 例 !"级 ,N 例 ! #级 ,P 例$标 本 行 ;=>? 蛋 白 免 疫 组 化 检 测 及 $(1565740 免 疫 荧 光 染 色 检 测) 结 果!免 疫 组 化 结 果 显 示 正 常 组 中 ;=>? 蛋 白 的 表 达 率 *,HOHW$与 肿 瘤 各 组 之 间 *恶 性 肿 瘤 组 表 达 率 ,HHW! 良 性 肿 瘤 组 PJO,W$ 的 差 异 有 统 计 学 意 义 *!X HOH,$! 恶 性 肿 瘤 组 与 良 性 肿 瘤 组 之 间 的 差 异 无 统 计 学 意 义*!YHOH%$)癌 组 织 组 中 ;=>? 强 阳 性 率*!ZZ$*,HHW$均 显 著 高 于 腺 瘤 组 *D,O,W$及 正 常 组 *HW$*均 为 !XHOHH,$+ 腺 瘤!级 *,,O,W$与 腺 瘤"级 *NDO%W$及#级 *PCONW$组 织 中 ;=>? 强 阳 性 率 之 间 的 差 异 有 统 计 学 意 义 *!XHOH%$! 而 腺 瘤#级 与 腺 瘤"级 间 的 差 异 无 统 计 学 意 义 *!YHOH%$) 免 疫 荧 光 结 果 显 示 结 直 肠 癌 组 中 心 体 扩 增 阳 性 率 *,HHW$ 显 著 高 于 正 常 组 *H$及 腺 瘤 组 *DCOJW$*均 为 !XHOH,$+腺 瘤!级*CCOCW$与 腺 瘤#级 *NPOHW$中 心 体 扩 增 阳 性 率 之 间 的 差 异 有 统 计 学 意 义*!XHOH%$!而 腺 瘤!级 与 腺 瘤"级 *NHODW$-腺 瘤"级 与 腺 瘤#级 之 间 的 差 异 无 统 计 学 意 义 *!YHOH%$) 结 论!;=>? 蛋 白 及 中 心 体 扩 增 常 见 于 结 直 肠 肿 瘤 中! 其 表 达 水 平 与 肿 瘤 的 组 织 学 分 级 及 恶 性 程 度 相 关 ) ;=>? 蛋 白 表 达 与 中 心 体 扩 增 呈 高 度 的 正 相 关) 关键词! 结直肠肿瘤+;=>?+基因表达+中心体 中图分类号!BN&% 文献标识码!! 文章编号!,HHHICDN[*-HHP$,-I,-NNIHD 高 颖!等O 结直肠肿瘤中 ;=>? 基因的表达及其与中心体改变的关系!"#$ C M Y K !!" ! "###于 室 温 ! $$洗 涤 后 加 %&’()(*& 抗 兔 抗 体%+,-. 公司&室温 /# 0(&$+,1 显色$苏木精复 染’中性树胶封片( 阴性对照)免疫前兔血清及 !2 314 代替第一抗体* 结 果 判 断) 在 阴 性 对 照 无 着 色 时$5%67 阳 性 主要为结直肠腺体细胞核呈棕黄色* 根据肿瘤细 胞着色的比例对组织进行阳性强度分级) 无着色 或阳性细胞 8"9为:+ "9;"#9细胞阳性$一般强 度为 <+ ="#9;>#9细胞阳性$强阳性着色 为<<+ =>#9细胞$超强阳性着色为<<<* !"# 免疫荧光 组 织 切 片 依 次 经 二 甲 苯 脱 蜡 , 梯 度 乙 醇 水 化 后 $于 #?/9过 氧 化 氢 室 温 ! $ 处 理 $柠 檬 酸 缓 冲 液 于 微 波 @"A B# 0(& 抗 原 修 复* 牛 血 清 白 蛋 白 !B9 &室 温 封 闭 ! $ 后 $滴 加 一 抗 !CDEFEG(& !!" B ###&!购自 4H&DH IJEK 公司& 于室温 ! $$洗 涤后加标记有 5L65I 的抗山羊抗体 6MN 二抗 !中 杉公司&室温 /# 0(&$+,36 复染核$甘油封片* 阴 性对照)用免疫前血清及 !2314 代替第一抗体* 结果判断) 在荧光显微镜下 LO.+ 通道及紫 外通道下观察$阴性对照无着色时$中心体扩增阳 性主要为细胞核周围有 B 个或 B 个以上红色点状 或块状荧光* !"$ 统计学分析 数 据 采 用 4344!/?# 统 计 分 析 软 件 进 行 分 析* 结 直 肠 正 常 黏 膜 组 ’ 腺 瘤 组 及 结 直 肠 癌 组 之 间 5%67 表 达 异 常 及 中 心 体 异 常 的 差 异 采 用 B2B 列 联表 "B 检验分析* 5%67 表达异常与中心体异常之 间的关系采用相关性分析* !8#?#" 为有统计学意 义* % 结 果 %"! 结直肠肿瘤中 &’() 蛋白的表达 5%67 免 疫 组 化 阳 性 为 细 胞 核 着 色$部 分 病 例 伴有核周着色* 大多数病例呈肿瘤细胞弥漫性阳 性分布!图 !&* 免疫组化结果见表 !* 对 / 组病例 的 5%67 阳性率进行统计$结果显示在结直肠正常 黏膜组与肿瘤各组之间阳性率的差异有统计学意 义!均为 !8#?##!&$而恶性肿瘤与良性肿瘤之间的 差异无统计学意义!! =#?#"&* I, + 1 % 7 图 ! 免疫组化染色检测人结直肠肿瘤组织 5%67 蛋白表达 !%&’()(*& 2B##" 7(MEJP ! %QRJP))(*& *S DPG*0PJH)P DJH&)TJ(RD(*&HG PGP0P&D)C(&DPJHTD(&M SHTD*J !5%67& (& $E0H& T*G*JPTDHG DE0*J D())EP) !%&’()(*& 2B##& 3*)(D(UP PQRJP))(*& G*THDPV (& D$P &ETGP( () FJ*W&? ,$ HVP&*0H *S NJHVP ! !< &+ 1$ HVP&*0H *S NJHVP B !<< &+ I$ HVP&*0H *S NJHVP / !<<< &+ +$ WPGGCV(SSPJP&D(HDPV HVP&*THJT(&*0H !<<< &+ %$ 0*VPJHDPGXCV(SSPJP&D(HDPV HVP&*THJT(&*0H !<<< &+ 7$ R**JGXCV(SSPJP&D(HDPV HVP&*THJT(&*0H !<<<&? 高 颖!等? 结直肠肿瘤中 5%67 基因的表达及其与中心体改变的关系 !"#$ C M Y K !"#$% &"%"’()#$% )$*)(’ +,(*"-$ ."’-$% #/001( 2(%%3,/44(’(*#/$#(, $,(*")$’)/*"-$ 5",(’$#(%63,/44(’(*#/$#(, $,(*")$’)/*"-$ 7""’%63,/44(’(*#/$#(, $,(*")$’)/*"-$ 8’9,( : 8’9,( ; 8’$,( < ."’-$% /*#(0#/*$% -1)"0$ .1-=(’ <> ? :@ A :A :@ :B :> C > !>D>" > !>E>" > !>E>" > !>E>" : !?EF" > !>E>" > !>E>" B!B>E>" G > !>D>" > !>D>" > !>D>" > !>D>" :?!A<D<" H!;<D?" : !?D<" :!:>D>" GG :>!<<D<" H!A>D>" ?!;BDH" :!:;D?" ;!::D:" :>!?ADA" :>!?;DF" > !>D>" GGG ;>!FFD@" :!;>D>" :;!@>DF" @!A@D?" > !>D>" <!:@DF" A!H;D:" > !>D>" + I & J K L 图 ; 免疫荧光染色检测人结直肠肿瘤组织中 !3#1=1%/* 蛋白表达!免疫荧光 M: >>>" L/N1’( ; KOP’(00/"* "4 !3#1=1%/* /* Q1-9* )"%"’()#9% #1-"’ #/001(0 !/--1*"4%1"’(0)(*)( M: >>>" 7"0/#/R( (OP’(00/"* "4 !3#1=1%/* /0 0Q"S* 90 #S" "’ -"’( ’(, 4%1"’(0)(*# P9’#/)%(0 9’"1*, #Q( *1)%(/D +# 9,(*"-9 "4 8’9,( :!T"$ I# 9,(*"-9 "4 8’9,( ; !T "$ &# 9,(*"-9 "4 8’9,( < !G "$ J# S(%%3,/44(’(*#/9#(, 9,(*")9’)/*"-9 !G "$ K# -",(’9#(%63 ,/44(’(*#/9#(, 9,(*")9’)/*"-9 !G "$ L# P""’%63,/44(’(*#/9#(, 9,(*")9’)/*"-9 !G"E 高 颖!等E 结直肠肿瘤中 UKVL 基因的表达及其与中心体改变的关系 !"! #$%& 蛋白表达强度与结直肠肿瘤类型的关系 各 级 别 腺 瘤 及 癌 组 织 中 UKVL 蛋 白 的 阳 性 表 达强度见表 :% UKVL 蛋白表达在正常组与结直肠腺 瘤组及结直肠癌组之间的差异均有统计学意义!均 为 !W>E>:"% 癌组织组中 UKVL 强阳性率均显著高于 腺瘤组!均为 !W>E>:"$腺瘤 : 级与腺瘤 ; 级&< 级之 间的差异有统计学意义!!W>E>?"#但腺瘤 < 级与腺 瘤 ; 级之间的差异无统计学意义!!X>E>?"% 表 ! 各组结直肠组织中 "#$% 蛋白阳性率及表达强度 "&’() ! *+,-.-/) 0&.), &12 ()/)(, +3 .0&1,40-5.-+1&( )()6)1.,7-1.)0&4.-18 3&4.+0!"#$%" )950),,-+1 -1 /&0-+:, .;5), +3 4+(+0)4.&( .-,,:), UKVL ’*1-=(’ !Y"( 8’"1P U6P( 肠癌组 UKVL 蛋白强阳性表达结果显示) 高分 化腺癌与中分化腺癌& 低分化腺癌 UKVL 超强表达 率 差 异 有 统 计 学 意 义!均 为 !W>E>?"#而 后 两 者 之 间的差异无统计学意义!!X>E>?"% !"’ 中心体扩增检测 荧光显微镜下可见细胞核周围有红色点状荧 光!图 ;"% 在结直肠癌组织中可见大多数肿瘤细胞 核周围大于 ; 个红色点状荧光及块状荧光#提示在 !"#$ C M Y K 高 颖!等! 结直肠肿瘤中 "#$% 基因的表达及其与中心体改变的关系 这些细胞中 !&’()(*+, 蛋白异常表达!即在这些细胞 中中心体出现异常扩增" 结直肠癌组中心体扩增阳 性率显著高于正常肠黏膜及腺瘤组#均为 !-./.0$% 腺瘤 0 级与腺瘤 1 级之间的差异有统计学意义#!2 ./.3$!而腺瘤 0 级与腺瘤 4 级&腺瘤 4 级与腺瘤 1 级之间的差异无统计学意义#!5./.3$!见表 4’ 表 ! 结直肠组织中中心体扩增检测 "#$%& ! ’&()*+,+-& #-.%/0/1#)/+( /( 1+%+*&1)#% )/,,2&, "6’7* 86*69:;’7* ;7,;:9 <=:,6>7 ?69>7* ’+@@(: A:**&=+BB:9:,’+7’:= C6=:97’:*D&=+BB:9:,’+7’:= E669*D&=+BB:9:,’+7’:= F97=: 0 F97=: 4 F97=: 1 ?69>7* +,’:@’+,7* >(;6@7 1. 3 0G H 0H 0G 0I 0. E6@+’+J: (,(>):9#K$) 1.#0..!.$ L#0..!.$ 0L#0..!.$ G#0..!.$ H #LL!L$ 04 #G.!M$ 03 #GI!.$ . #.!.$ ?:N7’+J: #,(>):9$ . . . . 0. 3 L 0. 8:,’96@6>: 7>O*+B+;7’+6, F96(O "DO: !"# 中心体扩增与结直肠癌类型的关系 在肠癌组中!高分化肠癌组织中中心体扩增阳 性率为 0..K#3 P 3$!强阳性率为 .K#. Q 3$* 在中分 化 肠 癌 组 织 中 !&’()(*+, 阳 性 率 为 0..K#0G Q 0G$! 强阳性率为 GM!3K#01 Q 0G$! 超强阳性率为 4I!LK #3 Q 0G$* 在低分化肠癌组织中 !&’()(*+, 阳性率为 0..K#H Q H$!超强阳性率为 HG!3K#G Q H$* 即随着肿 瘤分化程度的降低!其中心体扩增强阳性率呈现增 高的现象* !"$ %&’( 蛋 白 表 达 强 度 与 中 心 体 异 常 扩 增 的 相 关性 "R$% 蛋白及中心体扩增呈显著的线性相关性 #"S.!M4H!!2.!..0$!详见表 1* ) 讨 论 "R$% 蛋 白 为 新 近 克 隆 的 调 节 端 粒 酶 T"RU" 基因表达的转录因子! 它通过与 T"RU" 上游调节 区特异结合!激活内源性 T"RU" >U?< 表 达 水 平 和 端 粒 酶 活 性* 并 且 在 前 期 研 究 结 果 显 示 !"R$% 基因的表达与端粒酶活性一致! 而降低其表达则 显著抑制癌细胞生长和恶性表型 (LVG)* 本研究结果 显示结直肠癌中 "R$% 蛋白表达率高!结合先前的 研究结果!有理由推测 "R$% 在结直肠良性病变的 早期就出现异常! 并与结直肠肿瘤发生中的端粒 酶 激 活 或 生 物 学 特 性 有 一 定 关 系 * 有 研 究 证 明 "R$% 蛋白 8V末端定位于中心体! 提示不仅 "R$% 参与端粒酶活 性 调 节!其 基 因 产 物 还 可 能 作 为 重 要 的 中 心 体 调 节 蛋 白!参 与 对 端 粒 异 常 诱 导 的 中 心体反应调节 (H)* "R$% 蛋白表达在结直肠癌高表 达! 显著高于各级别的结直肠腺瘤及正常的黏膜 组织%同时!在结直肠腺瘤 1 级并局部恶性变的病 例中 "R$% 蛋白表达明显高于腺瘤 0 级!这也表明 "R$% 蛋白在结直肠肿瘤恶性变过程中可能是其恶 性 转 变 的 标 志 物!"R$% 蛋 白 表 达 有 可 能 成 为 结 直 肠肿瘤特别是结直肠腺瘤恶变的标志物而用于鉴 别诊断* 本研究通过检测 "R$% 蛋白在结直肠肿瘤 组织中的表达! 初步显示其在结直肠肿瘤组织中 的高表达!也提示 "R$% 可能成为结直肠肿瘤的治 疗靶点* 最近的研究表明!在许多其他肿瘤#如膀胱癌+ 软组织肿瘤等$中均有中心体的扩增(I!0.)"中心体缺 陷还可以增加其他肿瘤相关基因进一步发生遗传 改变的可能性! 进而影响肿瘤的发展(4)" 本研究结 果显示在结直肠癌组织中!中心体异常显著高于结 直 肠 各 级 别 腺 瘤 ,0 级&4 级&1 级 分 别 为 LL!LK& 表 3 肿瘤组织中 "456 蛋白表达强度与中心体扩增的关系 "#$%& 3 7+**&%#)/+( +0 "456 &8.*&,,/+( %&9&%, :/); 1&()*+,+-#% #-.%/0/1#)/+( /( 1+%+*&1)#% )/,,2&, ,(2-$&*$ "R$% :WO9:@@+6, V X XX XXX "6’7* V YZ 4Y 43 G M1 X Z Z G 4L 1Y "6’7* YZ 4Y 14 1Y IL 8:,’96@6>: 7>O*+B+;7’+6, ?(>):9 !"#! C M Y K ...