循环肿瘤细胞与个体化药物治疗.pdf
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!癌症" !"#$%&% ’()*$+, (- .+$/%*# 0112# 03$45%&500675002
!综 述!
自!肿 瘤 个 体 化 药 物 治 疗"的 概 念
提 出 至 今 # 肿 瘤 个 体 化 药 物 治 疗 的 研
究 已 经 取 得 了 不 少 成 果 $ 吉 非 替 尼 更
适 用 于 存 在 89:; 突 变 的 患 者 %5#0&#
<;=> 突 变 与 西 妥 昔 单 抗 耐 药 有 关 %?&#
8;..5 和 @;.=5 的 表 达 水 平 可 以 作
为 肺 癌 和 胃 癌 含 铂 方 案 化 疗 耐 药 的
预 测 指 标 %A7B&’ 但 所 有 的 这 些 研 究 都
是 在 可 以 获 取 肿 瘤 组 织 的 患 者 中 进
行 的 ’ 由 于 肿 瘤 有 异 质 性 #随 着 药 物
的 使 用 # 肿 瘤 的 基 因 表 达 C 突 变 会 发
生 改 变 %3#2&’ 最近一项大规模研究结果
显示#05D的乳腺 癌 患 者 转 移 灶 的 雌 激
素 C 孕 激 素 受 体 或 E8;F0 的 表 达 与 原
发 灶 相 比 发 生 了 变 化 %51&’ 因 此 为 了 更
好 地 对 肿 瘤 患 者 实 施 个 体 化 选 药 #需
要 对 肿 瘤 的 性 质 进 行 实 时 监 测# 而 早
在 一 百 多 年 前 就 提 出 的 循 环 肿 瘤 细 胞
(/#*/),+G#$H G)I(* /%,,&# !J.)则使对肿
瘤的实时监测成为可能’0113 年 =>.K
大 会 上 就 有 学 者 报 告 了 用 .J. 来 监 测
肿 瘤 细 胞 的 基 因 表 达 变 化 # 并 指 出 化
疗 前 后 .J. 的 基 因 表 达 的 确 会 发 生 变
化$ 化疗前 8LM; 阳性的 5A 例 转 移 性
结 直 肠 癌 患 者 经 过 A 个 周 期 的 化 疗 后
仍有 5? 例是 8L:; 阳性表 达# 而 化 疗
前 8L:; 阴 性 表 达 的 3 例 患 者 经 过 化
疗 后 有 B 例 变 为 阳 性 表 达 %55&’ 由 于 脱
落 入 血 的 .J. 可 以 给 我 们 提 供 潜 在 的
实 时 肿 瘤 标 本# 因 此 研 究 .J. 的 性 质
对 实 施 实 时 个 体 化 药 物 治 疗 来 说 具 有
重要的临床意义’
! "#"
.J. 是 指 存 在 于 肿 瘤 患 者 的 外 周
血 中 能 够 逃 离 宿 主 的 免 疫 杀 伤 而 存 活
下 来 的 肿 瘤 细 胞 ’ 尽 管 肿 瘤 转 移 是 涉
及 很 多 因 素 的 复 杂 过 程 #但 .J. 仍 然
被 认 为 是 肿 瘤 转 移 的 一 个 重 要 因 素 ’
一 项 研 究 模 型 显 示 #平 均 每 克 肿 瘤 组
织 每 天 会 释 放 511 万 个 肿 瘤 细 胞 入
血 %50&# 但 这 些 肿 瘤 细 胞 在 循 环 中 的 存
活 率 极 低 %5?&#绝 大 多 数 肿 瘤 细 胞 会 发
生 失 巢 凋 亡 # 只 有 极 少 一 部 分 具 有 较
%$%&’()*’& !"#$%&’(")* (%+,# -.&&/ (!0!) 1’2. 3..) "4.)("5".4 ") 6.#"61.#’&
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!摘 要" 循环肿瘤细胞(/#*/),+G#$H G)I(* /%,,&# .J.)已经被证实存在于肿瘤患
者尤其是晚期患者的外 周 血 中’ 近 年 来 .J. 的 研 究 技 术 迅 速 发 展 并 且 在 肿 瘤 个
体 化 药 物 治 疗 方 面 显 示 出 良 好 的 发 展 前 景’ .J. 的 重 要 性 在 于 它 可 以 使 基 因 表
达 C 突 变 的 检 测 变 得 切 实 可 行#从 而 实 现!实 时"个 体 化 药 物 治 疗’ 本 文 主 要 介 绍
现有的 .J. 检测 C 收集技术及其在 个体化药物治疗方面的作用’
关键词#肿瘤* 循环肿瘤细胞* 个体化药物治疗
中图分类号#;B?1NA? 文献标识码#=
文章编号#5111OAPBQ(0RR2)55S5006716
南京大学医学院附属鼓楼医院
肿瘤中心南京大学临床 肿 瘤 学 研
究所"
江苏 南京 051113
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通讯作者# 刘宝瑞
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收稿日期#0113F50F15
修回日期#0112F16F50
循环肿瘤细胞与个体化药物治疗
于韶荣" 魏 嘉" 钱晓萍" 刘宝瑞
"1(*23)’145 ’26/( *,33& )40 14017102)318,0 *9,6/’9,():-
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!""#
C M Y K
于韶荣!等! 循环肿瘤细胞与个体化药物治疗
强 侵 袭 能 力 的 肿 瘤 细 胞 可 以 表 达 凋 亡
抑 制 因 子 而 存 活 下 来 !"#"#这 些 存 活 下
来 的 肿 瘤 细 胞 即 是 $%$$ $%$ 在 血 中
的 含 量 极 少#一 般 认 为 " &’ 血 平 均 只
有 几 个 # 但 晚 期 肿 瘤 患 者 血 中 的 $%$
数目会 明显增多$
随 着 研 究 者 们 对 $%$ 的 重 视 #有
越 来 越 多 的 方 法 可 以 检 测 到 $%$ 的 存
在$ 这 些 方 法 对 $%$ 的 认 定 标 准 是 根
据 肿 瘤 细 胞 的 性 质 从 不 同 角 度 来 确 定
的$ 有的是根据细胞形态学来认定#如
细 胞 体 积 大#细 胞 直 径 超 过 () !&#有
不 规 则 的 胞 核 和 高 的 细 胞 核 浆 比 !")"%
有 的 是 根 据 分 子 生 物 学 指 标 来 认 定 #
如 循 环 细 胞 中 同 时 存 在 $*"+&
$*(,&$-. 和 鸟 苷 酸 环 化 酶 $’/$$(
的 阳 性 表 达 !"0"$ 还 有 的 是 根 据 免 疫 化
学 方 法 来 认 定 # 如 循 环 血 中 能 与 抗 表
皮 细 胞 黏 附 分 子 ’1234567438694195:6995
1;86<4=25&=96:>96# -7$.? 1234@=;A(结
合 且 细 胞 角 蛋 白 阳 性 表 达 &$B#) 阴 性
表 达 的 细 胞 !"C"$ 还 有 的 是 结 合 不 同 的
方 面 来 认 定 的 # 既 考 虑 到 细 胞 的 抗 原
表 达 又 考 虑 到 细 胞 的 形 态 学 !"D"$ 总 的
来 说#检 测 的 方 法 不 同#认 定 $%$ 的 标
准 也 不 同# 目 前 尚 没 有 一 个 公 认 的 认
定标准$
! "#" 对个体化药物治疗的意义
$%$ 之 所 以 对 个 体 化 药 物 治 疗 有
潜 在 的 重 大 意 义 # 主 要 是 由 于 个 体 化
药 物 治 疗 本 身 存 在 着 不 足 # 其 最 大 的
局 限 就 是 肿 瘤 组 织 的 获 取 $ 到 目 前 为
止#绝 大 多 数 研 究 都 是 针 对 有 手 术 E 活
检 肿 瘤 组 织 的 患 者 进 行 的 $ 在 实 际 工
作 中# 晚 期 或 非 手 术 患 者 通 过 活 检 获
得 的 肿 瘤 组 织 量 较 少 #检 测 基 因 表 达 F
突 变 非 常 困 难 $ 更 重 要 的 是 随 着 药 物
的 使 用 # 基 因 的 表 达 F 突 变 可 发 生 改
变#从而导致药物敏感性的改变 !D#+"$例
如 一 些 原 来 对 酪 氨 酸 激 酶 抑 制 剂 有 良
好 反 应 的 非 小 细 胞 肺 癌 患 者 在 开 始 治
疗 " 年 后 不 再 有 效 !"#"+"#继 发 耐 药 的 可
能 原 因 是 -/GH 出 现 了 二 次 突 变 #如
%C+, ? !D#+"#所 以 在 个 体 化 药 物 治 疗 的
过 程 中 应 该 对 肿 瘤 的 基 因 表 达 F 突 变
进 行 实 时 监 测 $ 然 而 在 实 际 工 作 中 多
次 获 取 肿 瘤 组 织 极 其 困 难 # 多 数 患 者
在 肿 瘤 切 除 后 很 难 找 到 可 测 量 病 灶
’除 非 复 发(#即 使 有 可 测 量 病 灶#也 很
难获取足够的组织$ 另外#获取肿瘤组
织 为 有 创 操 作#很 难 用 于 常 规 检 查#这
是 目 前 个 体 化 药 物 治 疗 面 临 的 最 大 挑
战$
如 何 简 单 无 创 地 获 得 肿 瘤 细 胞 并
服 务 于 个 体 化 药 物 治 疗 逐 渐 受 到 关
注#而 近 年 来 建 立 的 $%$ 的 检 测 F 收 集
技 术 无 疑 为 这 一 难 题 的 解 决 提 供 了 可
能$ (,,D 年)新 英 格 兰 医 学 杂 志*上 发
表 了 一 篇 用 $%$5:847 检 测 $%$ 的 文
章# 作 者 不 仅 检 测 了 肺 癌 患 者 $%$ 中
的-/GH 突变#而且耐药患者的 $%$ 中
也 检 测 出 与 耐 药 有 关 的 基 因 突 变
!(,"$ 可 以 预 见 用 高 灵 敏 度 的 方 法 对
$%$ 的 性 质 进 行 监 测 有 可 能 用 来 指 导
分子靶向药物的使用$
另 外 # 肿 瘤 治 疗 过 程 中 $%$ 数
目 的 变 化 有 可 能 成 为 监 测 早 期 转 移
和 评 价 治 疗 效 果 的 指 标 !(" "$ (,,D 年
的 一 项 大 规 模 的"期 临 床 研 究 表 明 #
肿 瘤 患 者 术 后 或 化 疗 前 $%$ 的 检 出
是 肿 瘤 早 期 复 发 的 独 立 预 测 指 标 !(("$
I3138=7=>9=> 等 !(J"的 研 究 也 表 明 #虽 然
其 他 指 标 均 提 示 有 良 好 预 后 的 乳 腺 癌
患 者# 但 如 果 术 后 检 出 $%$ 则 其 生 存
期 会 明 显 下 降# 提 示 $%$ 的 检 测 对 于
早 期 肿 瘤 患 者 是 否 实 行 术 后 辅 助 治 疗
可能是一个重要的评价指标$
最 后 #采 用 高 灵 敏 度 的 检 测 方 法
后 #$%$ 数 目 的 变 化 有 可 能 用 来 评 估
治 疗 的 反 应 $ 尽 管 研 究 对 象 的 例 数 有
限 #但 仍 然 观 察 到 在 治 疗 过 程 中 $%$
数 目 的 变 化 与 治 疗 的 效 果 呈 明 显 相
关 +$%$ 数 目 下 降 则 治 疗 有 效 % 而
$%$ 数 目 上 升 则 提 示 治 疗 无 效 &肿 瘤
进 展 !(, "$
$ "#" 检 测 % 收 集 技 术 在 个 体
化药物治疗领域的研究进展
检 测 $%$ 的 方 法 很 多 #其 中 聚 合 酶
链 反 应 ’K$H(和 逆 转 录 聚 合 酶 链 反 应
’H%5K$H( 是 比 较 常 见 的 $ 虽 然 随 着
K$H 技 术 的 不 断 进 步# 其 检 测 的 敏 感
性大大提高 !(##()"#但仍然 很 难 检 测 出 含
量极低的 $%$ 的基因表 达 F 突变$ 在此
不 再 赘 述 K$H 技 术# 而 仅 将 有 可 能 运
用 于 个 体 化 药 物 治 疗 的 技 术 逐 一 介
绍$
&’( 密度梯度离心法
密 度 梯 度 离 心 法 可 以 通 过 去 除 血
液 中 的 红 细 胞 和 一 部 分 粒 细 胞 而 将
$%$ 富集$ H=<62@6LM 等 !(0"用 密 度 梯 度
离 心 法 检 测 胃 肠 肿 瘤 患 者 的 $%$#其
检 出 率 为 J,N# 检 出 率 与 远 处 转 移 明
显相关$ 密度梯度 离心法的优点是+简
单 &廉 价 &快 速 #对 富 集 的 肿 瘤 细 胞 可
行 细 胞 涂 片 进 行 细 胞 计 数 # 也 可 以 用
K$H 或 H%5K$H 检 测 $%$ 的 基 因 表
达 F 突 变 %其 缺 点 是 +分 离 的 肿 瘤 细 胞
不 纯#分 离 效 率 不 高#有 相 当 一 部 分 肿
瘤 细 胞 丢 失$ 现 有 的 文 献 仅 将 此 方 法
用 来 检 出 $%$# 比 较 检 出 率 与 肿 瘤 分
期 的 关 系$ 遗 憾 的 是 尚 无 相 关 文 献 报
道 检 出 率 与 患 者 总 生 存 期 的 关 系 %也
没 有 文 献 报 道 用 该 方 法 检 测 肿 瘤 细 胞
的 基因突变$
&’! 基于上皮肿瘤细胞大小的分离法
基 于 上 皮 肿 瘤 细 胞 大 小 的 分 离 法
’4<=9134=2 @A <4O6 =P 6743869419 3>&=L
:699<# QI-%(最先由 R=21 等 !(C"报道$ 基
于 肿 瘤 细 胞 的 直 径 大 于 绝 大 多 数 血 细
胞 这 一 原 理#选 用 含 有 直 径 为 D !& 滤
孔 的 聚 碳 酸 酯 膜#将 外 周 血 通 过 滤 膜 #
$%$ 即可被截留$ " &’ 的 外 周 血 中 加
入一个肿瘤 细 胞#即 使 用 H%5K$H 方 法
检 测 失 败 #QI-% 也 可 以 将 肿 瘤 细 胞 检
测 出 来# 表 明 其 敏 感 性 高 于 H%5K$H$
在 体 内 实 验 中 #QI-% 不 仅 可 以 收 集 到
血 中 的 单 个 肿 瘤 细 胞 # 还 可 以 收 集 到
肿瘤微栓子$ (,,C 年#S862M 等 !(D"将实
验 材 料 改 进#使 用 更 先 进 的 K1LA9626 $
膜 分 离 $%$$ 与 聚 碳 酸 酯 膜 相 比 #
K1LA9626 $ 膜 的 滤 孔 分 布 密 度 大 且 分
布 均 匀#孔 与 孔 之 间 几 乎 不 会 融 合 #因
而 更 具 分 选 优 势 # 体 外 实 验 肿 瘤 细 胞
的回收率高达 +,N$
J!(!" 肝 癌 用 QI-% 分 离 $%$ 最 先
是 在 肝 癌 患 者 身 上 进 行 的 $ 用 这 种 方
法 认 定 循 环 肝 癌 细 胞 的 标 准 是 + 形 态
学特征加 .GK 染色阳性$ R=21 等 !")"对
## 例 早 期 原 发 性 肝 癌 患 者 进 行 $%$
检 测 # 其 中 有 (J 例 患 者 检 出 了 $%$#
且 $%$ 的 检 出 与 肿 瘤 播 散& 门 静 脉 癌
栓和短的生存期明显相关$ 对从 ", 名
患 者 中 获 得 的 0, 个 $%$ 分 别 进 行 巢
式 K$H 检 测 #5连 环 蛋 白 ’$5:136242(
的 突 变 # 其 中 有 J 例 患 者 发 生 突 变 #
!""#
C M Y K
而 ! !"#$%&’& 突 变 被 报 道 与 肿 瘤 进 展
有 关 !()"*+#$ ,-&# 等 研 究 的 可 贵 之 处 在
于 收 集 到 ./. 后" 又 对 其 进 行 了 分 子
生 物 学 分 析" 为 检 测 ./. 的 基 因 突 变
或表达带来了曙光$
*0(0( 乳 腺 癌 乳 腺 癌 也 是 123/ 方
法 研 究 比 较 多 的 肿 瘤 之 一 $ 乳 腺 癌
435!6 的 过 表 达 是 使 用 分 子 靶 向 药 物
曲妥珠单抗的适应证$ 7’&8#&’ 等 !*9# 用
123/ 获取 ./. 后"提 取 其 :;< 研 究 其
435!6 的 扩 增 水 平 " 结 果 = 例 患 者 的
./. 和 病 理 组 织 切 片 中 435!6 的 扩 增
水 平 有 良 好 的 一 致 性$ 这 提 示 用 123/
分 离 肿 瘤 细 胞 的 方 法 对 指 导 个 体 化 药
物 治 疗 有 良 好 的 发 展 前 景 $ 通 过 检 测
乳 腺 癌 患 者 ./. 的 435!6 扩 增 水 平
有 望 用 于 指 导 分 子 靶 向 药 物 曲 妥 珠 单
抗 的 临 床 使 用 $ 当 然 这 种 检 测 方 法 仍
需 要 更 多 的 实 验 数 据 和 大 规 模 的 临 床
试验来验证$
123/ 获 得 肿 瘤 细 胞 的 方 法 原 理 简
单 "成 本 低 "敏 感 性 较 高 "可 以 对 ./.
进 行 进 一 步 的 分 子 生 物 学 检 测" 有 望
指 导 肿 瘤 的 个 体 化 药 物 治 疗 $ 但 到 现
在 为 止 这 种 方 法 所 研 究 的 肿 瘤 类 型 较
少" 有 些 类 型 的 肿 瘤 细 胞 如 小 细 胞 肺
癌 由 于 肿 瘤 细 胞 的 体 积 小 " 并 不 适 用
于该方法$ 另 外"血液中的 ./. 的大小
也 并 不 一 致 " 一 些 体 积 偏 小 的 细 胞 很
容 易 漏 检$ 以 上 的 这 些 缺 点 都 可 能 限
制该方法的 应用$
!"! 免疫磁性分离
免 疫 磁 性 分 离 是 目 前 应 用 最 广 的
./. 分 离 技 术 " 分 离 效 果 明 显 优 于 密
度梯度离心法 !*6#$ 其原 理是%作为载体
的 磁 珠 表 面 连 接 抗 体 " 抗 体 可 以 特 异
地 与 肿 瘤 细 胞 结 合 " 同 时 磁 珠 又 具 有
超 顺 磁 性" 将 其 放 入 磁 场 中 即 可 分 离
与 其 结 合 的 细 胞 $ 基 于 此 原 理 发 展 起
来 的 .%>>2%#?"@ 是 一 种 半 自 动 化 的
./. 检 测 仪 器" 已 被 美 国 A:< 批 准 用
于 预 测 乳 腺 癌 患 者 的 无 病 生 存 期 和 总
生 存 期 $ 近 几 年 ".%>>2%#?"@ 也 逐 渐 用
来检测其他肿瘤患者的 ./.$
*0*09 乳 腺 癌 乳 腺 癌 是 用 .%>>
2%#?"@ 研 究 的 最 早 的 肿 瘤 之 一 "
.%>>2%#?"@ 也 是 目 前 唯 一 被 美 国 A:<
批 准 可 用 于 预 测 乳 腺 癌 患 者 无 病 生 存
期和总生存期的 ./. 检测仪器$ 乳腺癌
患者每次治疗前"每 =0B CD 的血中检测
出 超 过 B 个 ./. 提 示 预 后 不 良 !**"*E#$
最 新 的 研 究 结 果 也 显 示" 手 术 切 除 的
乳 腺 癌 患 者 接 受 新 辅 助 化 疗 后 检
出 ./. 是 早 期 复 发 的 独 立 的 预 测
指 标 !66#$ 研 究 发 现 随 着 肿 瘤 的 进 展 "
乳 腺 癌 的 435!6 的 表 达 水 平 会 发 生
变 化 !*B#"因 此 通 过 监 测 肿 瘤 患 者 ./.
的 435!6 的 表 达 水 平 有 可 能 为 临 床
医 生 用 药 提 供 依 据 $ F%&G 等 !HB#研 究
发 现"在 6E 例 原 发 肿 瘤 435!6 阴 性 表
达的患者中"随着疾病的进展有 I 例患
者 在 ./. 中 发 现 了 435!6 基 因 的 扩
增"其中有 E 例患者接受了曲妥珠单抗
为基础的治疗"有 9 例 患者获得了完全
缓解"还有 6 例获得了部分缓解$
H0H06 前 列 腺 癌 前 列 腺 癌 是 西 方 国
家 的 高 发 肿 瘤 之 一" 在 ./. 上 的 研 究
也 相 对 较 多$ 前 列 腺 癌 是 各 种 肿 瘤 中
./. 检 出 数 目 比 较 高 的 肿 瘤 之 一 !HJ#$
2@#KK%? 等 !9=#用 .%>>2%#?"@ 检 测 了 JH 例
进 展 性 激 素 抵 抗 的 前 列 腺 癌 患 者 的
./."结 果 表 明"每 =0B CD 外 周 血 中 平
均 可 分 离 出 9J 个 ./." 大 部 分 患 者
&JBL ’ 分 离 的 ./. 数 大 于 B 个 " 且
./. 的 数 目 超 过 B 个 就 可 以 行 分 子 生
物 学 检 查 "包 括 3MA5 表 达(染 色 体 倍
数 和 雄 激 素 受 体 扩 增 等$ 这 有 利 于 我
们 了 解 肿 瘤 的 性 质" 从 而 进 行 个 体 化
选药$
*0*0* 其 他 肿 瘤 使 用 .%>>2%#?"@ 分
离 法 的 大 样 本 多 病 种 的 研 究 结 果 来 自
<>>#?N 等 !HJ#的研究$ 其研究是从 IJE 例
转 移 性 肿 瘤 患 者 所 收 集 的 6 9OH 例 血
标 本 中"每 =0B CD 血 中 检 出 的 ./. 平
均数为 J+ 个) 并报道了各种转移 性肿
瘤 患 者 检 出 的 ./. 平 均 数 &=0B CD
血’%前列腺癌 =B 个"卵巢癌 J 个"乳腺
癌 OE 个"胃癌 6E 个"结直肠癌 E 个"膀
胱癌 E6 个"肾癌 9 个"肺癌 H+ 个"胰腺
癌 6 个"原发灶不明肿瘤 9J 个$遗憾的
是 其 研 究 结 果 仅 检 出 了 不 同 肿 瘤 患 者
./. 的平均数"并没有对获得的肿瘤细
胞进行分子生物学研究$
由 于 .%>>2%#?"@ 是 一 种 半 自 动 化
的 测 量 工 具 " 可 以 减 少 人 为 因 素 造 成
的 误 差" 还 可 以 通 过 多 个 实 验 室 使 结
果标准化 !HJ#"因而有利于应用临床$ 对
获 得 的 超 过 一 定 数 目 的 ./. 还 可 以 进
行 分 子 生 物 学 研 究 " 是 目 前 最 有 潜 力
大 规 模 临 床 应 用 的 一 种 分 离 方 法$ 但
是 这 种 方 法 在 分 离 的 过 程 中 仍 会 有 相
当 一 部 分 肿 瘤 细 胞 丢 失 " 分 离 效 率 并
不 高 " 分 离 的 纯 度 也 很 低 &+0+9LP
+09L’!*=#"对个体化检测不利$
!"# 微芯片技术
微 芯 片 技 术 是 由 ;#G?#$@ 等 !9O# 于
6++= 年 率 先 报 道 的$ 他 们 将 载 有 抗 表
皮 细 胞 黏 附 分 子 抗 体 &#&$’!%Q’$@%>’#>!
"%>>!#N@%R’-&!C->%"S>%"3Q.<F #&$’T-N’%R’
的 微 柱 制 作 成 一 个 小 的 芯 片 " 外 周 血
不 需 任 何 处 理 就 可 以 通 过 一 套 特 定 的
装 置 通 过 微 芯 片"肿 瘤 细 胞 即 可 截 留 $
对 所 获 得 的 细 胞 分 别 进 行 E"J!
N’#C’N’&-!6!Q@%&U>’&N->% &:<71’ 染 色 (
玫 瑰 红 结 合 的 抗 细 胞 角 蛋 白 抗 体 和 荧
光 素 结 合 的 抗 .:EB 抗 体 染 色"其 中 抗
细 胞 角 蛋 白 染 色 阳 性 即 为 ./.".:EB
阳 性 即 为 污 染 的 血 细 胞 $ 这 种 方 法 检
测 的 敏 感 性 超 过 IIL" 获 得 的 细 胞 中
./. 的 纯 度 高 达 B+L"比 .%>>2%#?"@ 的
分 离 纯 度 高 出 两 个 数 量 级 " 更 有 利 于
分子生物学检测$
*0E09 肺 癌 微 芯 片 技 术 方 法 对 肺 癌
的 研 究 是 最 深 入 的$ 6++O 年 有 报 道 用
微 芯 片 技 术 分 离 转 移 性 非 小 细 胞 肺 癌
患 者 外 周 血 中 的 ./." 并 对 分 离 的
./. 进 行 3MA5 突 变 和 酪 氨 酸 激 酶 抑
制 剂 耐 药 的 相 关 基 因 /=I+O 突 变 的 检
测 !6=#$ 由 于 这 种 方 法 得 到 的 ./. 数 目
多&=E 个 ./. V CD 外 周 血’(纯 度 高"因
而 对 3MA5 突 变 的 检 出 率 高 达 I6L "
且 能 够 检 测 出 与 酪 氨 酸 激 酶 抑 制 剂 耐
药相关的 3MA5 二次突变"可用来指导
分 子 靶 向 药 物 的 使 用 $ 在 治 疗 的 过 程
中 ./. 数 目 的 变 化 与 治 疗 的 效 果 有 明
显 相 关" 提 示 采 用 这 种 高 灵 敏 度 的 方
法 对 ./. 数 目 的 变 化 进 行 监 测 有 可 能
用来评价肿瘤治疗的效果$
*0E06 其 他 肿 瘤 由 于 微 芯 片 技 术 是
新 报 道 的 检 测 方 法 " 在 其 他 肿 瘤 的 研
究 尚 未 见 详 细 报 道"但 从 转 移 性 肺 癌 (
前 列 腺 癌 (胰 腺 癌 (乳 腺 癌 和 结 直 肠
癌 的 患 者 的 外 周 血 中 也 分 离 到 了 数
量 可 观 的 ./. !9O # $ 虽 然 尚 无 文 献 报
道 这 些 ./. 的 后 续 的 分 子 生 物 学 检
查" 但 鉴 于 已 有 文 献 肯 定 了 分 子 生 物
学 检 查 的 可 行 性 " 我 们 有 理 由 相 信 微
于韶荣!等0 循环肿瘤细胞与个体化药物治疗 !""#
C M Y K
芯 片 技 术 在 指 导 个 体 化 药 物 治 疗 方 面
的巨大潜力!
微 芯 片 技 术 可 以 一 次 从 全 血 中
分 离 肿 瘤 细 胞 " 比 以 往 的 技 术 更 先
进 "获 得 的 肿 瘤 细 胞 数 也 是 各 种 技 术
中 最 高 的 " 且 分 离 纯 度 高 " 是 现 有
!"! 检 测 技 术 中 最 有 利 于 个 体 化 检
测 的 方 法 !
! 问题与展望
对 肿 瘤 患 者 的 !"! 研 究 虽 然 已
经 有 相 当 多 的 文 献 报 道 "但 真 正 着 眼
于 !"! 对 于 个 体 化 药 物 治 疗 研 究 报
道 并 不 多! 这 主 要 是 由 于 个 体 化 药 物
治 疗 在 肿 瘤 的 治 疗 领 域 还 是 一 个 比
较 新 的 理 念 "其 研 究 成 果 也 是 近 几 年
才 陆 续 有 文 献 报 道 "所 以 目 前 仅 有 少
数 研 究 者 关 注 !"! 在 个 体 化 药 物 治
疗 的 作 用! !"! 对 个 体 化 药 物 治 疗 的
作 用 主 要 是 通 过 实 时 检 测 !"! 的 基
因 表 达 # 突 变 情 况 为 肿 瘤 患 者 选 择 个
体 化 药 物 治 疗 "同 时 还 可 以 通 过 治 疗
中 !"! 数 目 的 变 化 来 预 测 预 后 和 治
疗 效 果 ! 但 由 于 报 道 例 数 有 限 "!"!
在 个 体 化 药 物 治 疗 中 的 地 位 仍 需 要
更 大 规 模 的 试 验 和 临 床 研 究 来 验 证 !
另 外 "!"! 在 个 体 化 药 物 治 疗 方 法 中
的 作 用 也 有 赖 于 更 多 的 个 体 化 治 疗
成 果 的 取 得!
虽然 !"! 的检测方法多种多样"但
真正已经进入临床的只有!$%%&$’()*"其
他 的 方 法 仍 处 于 研 究 阶 段 " 而 且
!$%%&$’()* 也没有大规模普及! 至 于 将
!"! 用 来 指 导 个 体 化 药 物 治 疗 则 尚 有
很长的路要走! 但不 可否认"!"! 对于
未 来 的 个 体 化 选 药 方 面 有 巨 大 的 研 究
潜 力! 希 望 在 不 久 的 将 来 !"! 检 测 可
以 切 切 实 实 地 服 务 于 临 床 " 使 广 大 肿
瘤患者受益!
!参 考 文 献"
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药 物 抵 抗 研 究 进 展 #7$8 中 华 肿 瘤 杂
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于韶荣!等8 循环肿瘤细胞与个体化药物治疗!""#
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!编辑"林志祥#校对"夏宁静$
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